高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又稱(chēng)“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支,以液體為流動(dòng)相,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)。 1903年俄國(guó)植物化學(xué)家茨維特(Tswett)**提出“色譜法”(Chromotography)和“色譜圖”(Chromatogram)的概念。茨維特使用色譜法 chromatography (來(lái)自希臘字, chroma 意思是顏色, graphy 意思是記錄 - 直譯為顏色記錄)來(lái)描述他的彩色試驗(yàn)。(令人好奇的是, 俄羅斯名字茨維特意思是顏色。) 他在論文中寫(xiě)到:“(原文)一植物色素的石油醚溶液從一根主要裝有碳酸鈣吸附劑的玻璃管上端加入,沿管濾下,后用純石油醚淋洗,結(jié)果按照不同色素的吸附順序在管內(nèi)觀察到它們相應(yīng)的色帶,就象光譜一樣,稱(chēng)之為色譜圖。”
1930年以后,相繼出現(xiàn)了紙色譜、離子交換色譜和薄層色譜等液相色譜技術(shù)。
1952年,英國(guó)學(xué)者M(jìn)artin和Synge 基于他們?cè)诜峙渖V方面的研究工作,提出了關(guān)于氣-液分配色譜的比較完整的理論和方法,把色譜技術(shù)向前推進(jìn)了一大步,這是氣相色譜在此后的十多年間發(fā)展十分迅速的原因。
1958年,基于Moore和Stein的工作,離子交換色譜的儀器化導(dǎo)致了氨基酸分析儀的出現(xiàn),這是近代液相色譜的一個(gè)重要嘗試,但分離效率尚不理想。
1960年中后期,氣相色譜理論和實(shí)踐發(fā)展,以及機(jī)械、光學(xué)、電子等技術(shù)上的進(jìn)步,液相色譜又開(kāi)始活躍。到60年代末期把高壓泵和化學(xué)鍵合固定相用于液相色譜就出現(xiàn)了HPLC。
1970年中期以后,微處理機(jī)技術(shù)用于液相色譜,進(jìn)一步提高了儀器的自動(dòng)化水平和分析精度。
1990年以后,生物工程和生命科學(xué)在國(guó)際和國(guó)內(nèi)的迅速發(fā)展,為高效液相色譜技術(shù)提出了更多、更新的分離、純化、制備的課題,如人類(lèi)基因組計(jì)劃,蛋白質(zhì)組學(xué)有HPLC作預(yù)分離等。
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